Desenvolvimento de métodos de conjugação de polissacarídeos capsulares com proteínas para obtenção de vacinas conjugadas. Química de macromoléculas. Caracterização de bioconjugados. Purificação de proteínas recombinantes como de Streptococcus pneumoniae e Leptospira Interrogans para uso como proteínas carreadoras em conjugados e de proteínas terapêuticas como IFN-α consensus e fator estimulador de granulócito humano recombinante (rhG-CSF). Métodos de isolamento e purificação de vesículas de membrana externa (OMV). Emprego de OMV como sistema de apresentação de antígenos. Modificação de biomoléculas de interesse biotecnológico.

A modificação química de biomoléculas, bioconjugação, é amplamente empregada em estudos biológicos e em vários produtos comerciais como vacinas conjugadas e proteínas terapêuticas peguiladas entre outros. 

Conjugação de polissacarídeos capsulares (PS) a proteínas carreadoras pela formação de uma ligação covalente é uma das abordagens mais eficaz na prevenção contra doenças causadas por bactérias encapsuladas. Os polissacarídeos capsulares são antígenos independentes de células T e não são protetores em crianças abaixo de 2 anos de idade, o maior grupo de risco. A ligação covalente com a proteína torna esse antígeno dependente de células T (TD) o que acarreta a indução de memória imunológica e proteção. Há disponível comercialmente vacinas conjugadas contra Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae e Neisseria meningitidis.

O processo de obtenção de vacinas conjugadas envolve tanto etapas biológicas como etapas químicas. A produção dos polissacarídeos bem como da proteína carreadora requer o cultivo de bactérias. No caso de uma vacina conjugada multivalente, é necessário o cultivo de cada sorotipo. Após as etapas de purificação dos polissacarídeos e das proteínas, estas macromoléculas serão submetidas a algumas reações químicas que dependerão dos grupos funcionais presentes. Esses processos são complexos e estudos envolvendo métodos alternativos de síntese, purificação e caracterização podem contribuir em uma maior disponibilização de tais conjugados. Em nosso laboratório já sintetizamos conjugados de polissacarídeo capsular de H. influenzae tipo b com toxóide tetânico e de S. pneumoniae sorotipos 6B, 14 e 1 com proteínas de superfície pneumocócicas (PspA).

Outro ponto de interesse é o emprego de OMVs de Neisseria lactamica como plataforma vacinal. As OMVs apresentam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs) que lhe conferem propriedades adjuvantes e possuem tamanho adequado para serem reconhecidas por células do sistema imune. Estamos avaliando métodos de isolamento/purificação de OMVs e o emprego de complexos OMV e proteínas recombinantes de Schistosoma mansoni.

Orientadora Plena nos Programas de Pós-Graduação Interunidades em Biotecnologia (USP/Butantan/IPT) e Biotecnologia e Bioprocessos do Instituto Butantan.

Barazzone, GC; Teixeira, ARF; Azevedo, BOP; Damiano, DK; Oliveira, MP; Nascimento, ALTO; Lopes, APY; Revisiting the development of vaccines against pathogenic Leptospira: innovative approaches, present challenges and future perspectives, Frontiers in Immunology, 12, 2022, https://doi.org/10.3389/fimmu.2021.760291.

Barbosa MMF, Kanno AI, Barazzone GC, Rodriguez D, Pancakova V, Trentini M, Faquim-Mauro EL, Freitas AP, Khouri M, Lobo-Silva J, Goncalves VM, Schenkman RPF, Tanizaki MM, Boraschi D, Malley R, Farias LP, Leite, LCC. Robust immune response induced by Schistosoma mansoni TSP-2 antigen coupled to bacterial outer membrane vesicles, International Journal of Nanomedicine 16, 2021, 7153-7168, https://doi.org/10.2147/ijn.S315786. 

Grabarz F, Lopes APY, Barbosa FF, Barazzone GC, Santos JC, Botosso VF, Jorge SAC, Nascimento ALTO, Astray RM, Gonçalves VM. Strategies for the production of soluble interferon-alpha consensus and potential application in arboviruses and SARS-CoV-2, Life, 11, 2021, https://doi.org/10.3390/life11060460.

Silva MA, Converso TR, Gonçalves VM, Leite LCC, Tanizaki MM, Barazzone GC. Conjugation of PspA4Pro with Capsular Streptococcus pneumoniae Polysaccharide Serotype 14 Does Not Reduce the Induction of Cross-Reactive Antibodies. Clinical and Vaccine Immunology, 2017; 24 (8): e00118-17. doi: 10.1128/CVI.00118-17

Perciani CT, Barazzone GC, Goulart C, Carvalho E, Cabrera-Crespo J, Gonçalves VM, Leite LCC, Tanizaki MM. Conjugation of polysaccharide 6B from Streptococcus pneumoniae with pneumococcal surface protein A: PspA conformational and its effect on the immune response. Clinical and Vaccine Immunology, 2013; 20 (6):858-866. doi: 10.1128/CVI.00754-12.

Alunos atuais

Egressos

Projeto FINEP – Doenças Negligenciadas – Integrante 

Plataforma de resposta rápida contra doenças negligenciadas: raiva, chikungunya e esquistossomose. Vigência: 2022-2025  

Projetos concluídos

Auxílio Regular FAPESP (n⁰ 2018/10384-4) - Coordenadora

Obtenção e avaliação imunológica de bioconjugados de interesse para a saúde humana. 

Vigência: junho/2019 a maio/2022 

Auxílio Regular FAPESP (n⁰ 2015/07225-3) - Coordenadora

Síntese e caracterização de conjugados obtidos entre polissacarídeos capsulares de Streptococcus pneumoniae e PspA como candidatos vacinais. 

Vigência: julho/2015 a dezembro/2017